免疫组化技术对肿瘤的组织发生和诊断越来越广泛，但特殊染色任是有用的方法之一，其优点是简单易行、染色时间短、染液便宜。由于子宫内膜癌的组织发生多数来源于苗勒氏管，持有正常子宫内膜分化的分泌特性，产生酸性唾液酸糖蛋白（AB+）、中性糖蛋白以及糖原（PAS+）分子，因此特殊染色AB（PH2.5）/PAS能简便、有效地观察与分析子宫内膜癌黏液定位方式、性质，为子宫内膜腺癌的诊断与鉴别诊断提供辅助。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　实验样本来自2007-2010年4年间我院初诊子宫内膜诊刮标本，年龄段21-79岁，平均49.7岁。其中对照组宫内膜均来自非子宫内膜病变切除的子宫标本20例（10例增殖期、10例分泌期），研究病例选取子宫内膜不典型增殖症6例、44例子宫内膜腺癌（33例内膜样型腺癌、8例浆液性乳头状癌、1例透明细胞癌、2例粘液腺癌）。

　　1.2标本处理与染色方法

　　所有实验标本均经福尔马林固定，石蜡包埋，4微米厚连续切片，二甲苯脱蜡后行阿尔新蓝（PH2.5）/希夫-过碘酸（AB（PH2.5）/PAS）组织化学法粘液染色。染色结果AB（+）：蓝色，PAS（+）：红色。

　　2结果

　　2.1对照组、不典型增殖症粘液表型  20例对照组正常生理期反应腺体腔顶缘AB（+），分泌期基底分泌空泡PAS（+）。6例不典型增殖症胞质AB（+）/PAS（-），周围不伴不典型增殖腺体頂缘AB（+）/PAS（-），显示不典型增殖酸性唾液酸分子合成的显著增加。

　　2.2子宫内膜腺癌粘液表型   33例子宫内膜样腺癌AB（+）/PAS（-），AB （+）定位显示与癌组织分化相关，腺管样高分化AB（+）位于頂缘着色，腔内分泌物AB（+）和（或）复合性AB/PAS（+），中低分化AB（+）位于癌细胞胞浆，伴有腺管样分化的5例乳头腺型亚型乳头顶浆CEA线状微弱AB（+），2例粘液分泌性亚型頂缘AB（+），分泌性粘液AB（+）；8例浆液性乳头状癌粘液染色AB（-）/PAS（-）；2例黏液腺癌胞质内及黏液性分泌物弥漫AB（+）；1例透明细胞癌PAS（+）/AB（-）。癌旁伴表面乳头状化生部分AB（+）/PAS（-）。（表1）

　　表1  44例子宫内膜腺癌黏液表型分析（例数）

　　组织类型NABPAS

　　内膜样腺癌33+-

　　浆液性乳头状腺癌8--

　　透明细胞癌1-+

　　粘液腺癌2+-

　　图①不典型增生症腺体细胞内AB（+）显色。中倍视野  图②高分化内膜样腺癌腺体腔缘AB微弱（+），腔内分泌物为少量AB（+）唾液酸粘液及PAS（+）中性糖蛋白物质。中倍视野  图③中等分化内膜样腺癌胞质AB（+），分泌物PAS（+）。高倍视野  图④浆液性乳头状癌AB（-）/PAS（-）。图⑤表面乳头状化生胞质内AB（+）/PAS（-）。中倍视野 图⑥分泌期腺体腔缘AB（+），基底分泌空泡PAS（+）。中倍视野

　　3讨论

　　6例不典型增殖症胞质AB（+）/PAS（-），周围不伴不典型增殖腺体頂缘AB（+）/PAS（-）。子宫内膜样腺癌粘液表型AB（+）/PAS（-），其中高中分化阳性定位于腺管样分化细胞頂缘，与正常生理期子宫内膜腺上皮细胞顶缘微弱的AB（+）分布一致，低分化区呈胞浆着色，显示说明随着细胞的不典型及癌分化程度减低AB着色由頂缘→胞质变化。AB表达方式的改变表明肿瘤细胞酸性唾液酸合成显著增加。可能原因是与机体细胞自正常演变到癌的过程中，细胞内和细胞膜上的寡糖结构发生明显变化，癌变细胞产生并分泌酸性唾液酸蛋白，肿瘤期癌细胞内合成分泌功能逐渐增加而致异常增加。

　　子宫内膜浆液性乳头状癌是一种比低级别的子宫内膜样腺癌侵袭性更高的肿瘤，特别是该肿瘤的初级发展阶段与子宫内膜癌亚型（乳头腺型）难以鉴别。浆液性乳头状癌复杂的乳头状分枝AB（-）/PAS（-），可能与乳头状癌属差分化，癌组织分化差，癌细胞排列紊乱极性消失，阻碍酸性唾液酸分泌；5例乳头腺型内膜样腺癌乳头顶缘AB线状（+）微弱着色。

　　子宫内膜透明细胞癌与粘液腺癌发生率低，1例透明细胞癌胞质内糖原PAS（+）/AB（-）。2例黏液腺癌细胞内外AB弥漫阳性显色。粘液腺癌与粘液分泌丰富的子宫内膜样腺癌亚型的染色区别主要是子宫内膜样腺癌丰富粘液AB（+）/PAS（-），而细胞内AB（-）/PAS（-）。

　　上述研究表明，子宫内膜腺癌瘤细胞酸性唾液酸合成增加、功能性分泌与肿瘤的分化程度有关，同时，与肿瘤的异质性有关有关。

　　由于女性生殖道上皮及间质都来自体腔上皮，具有高度的分化潜能。当激素、炎症及其它局部刺激作用于子宫内膜，均可引起子宫内膜腺上皮下的储备细胞向其它部位的苗勒管上皮分化（化生）。我们发现，癌旁部分表面上皮的乳头状化生AB染色阳性。有研究显示，子宫内膜的乳头状、粘液性、和鳞状化生有微卫星等位基因，他们出现于腺癌前病变和恶性子宫内膜而不出现于组织学正常的组织，提示有些化生是癌前病变【1】。因此，子宫内膜表明上皮乳头状化生酸性唾液酸增加是否是宫内膜异常增殖信号有待进一步随访、跟踪。

　　子宫内膜癌腺管样分化分泌物为AB（+）和（或）复合性糖蛋白AB/PAS（＋），而宫颈管腺癌肿瘤性粘液性分泌物一般ＡＢ（+），缺乏中性糖蛋白粘液及糖原成份。AB（+）/PAS（-）粘液染色有望作为宫颈管腺癌组织来源鉴别标志物之一。也有研究显示子宫内膜腺癌以粘蛋白含量少且以硫酸粘蛋白为主，而宫颈腺癌则以丰富的唾酸粘蛋白为主【2】。

　　【1】Faquin WC,Boynton KA,Mutter GL.Müllerian metaplasias are a feature of premalignant and malignant endometrium.Laboratory Investigation,1997,76:99A.。

　　【2】朱英桂，柳凤轩，贺光友。子宫内膜腺癌组化、免疫组化观察及临床意义[J]。第三军医大学学报，1998，20（2）：166-168.。

　　联系地址：陕西省西安市第四军医大学预防医学系放射医学教研室

　　邮编：710032      电话：13679248258

　　防原医学实验教学改革初探

　　郭娟，郭国祯

　　（第四军医大学军事预防医学系 放射医学教研室，陕西，西安，710032）

　　摘要：

　　防原医学是军队一门重要的军事预防医学主干学科，实验教学是从理论到实践的重要环节， 在人才培养中具有重要作用。该文对防原医学实验教学的认识、实验教学内容、实验教学中技术，手段的应用以及加强师资队伍建设等问题进行全面地分析， 在此基础上提出了具体的改革措施。

　　关键词：防原医学 实验教学 改革

　　一 防原医学实验教学的重要性及存在意义

　　防原医学是一门比较年轻的学科， 属于军事预防医学范畴，主要研究是研究电离辐射对机体产生生物效应的机制、放射损伤的临床诊治和放射防护的学科。它与基础医学、临床医学、预防医学领域的许多学科都有着密切的联系，是一门综合的边缘性学科[1]。防原医学是一门理论与实践高度统一的学科， 整个教学由理论教学、实验课及野外演习组成。实验教学作为防原教学的一部分对学员的成长起到了很大的作用，将其安排在基础理论课之后、野外演习之前不仅可以加深学员对所学概念、原理等理论知识的理解和巩固， 同时也可使学员掌握本学科的基本操作技能和技巧， 并且学会如何去观察、思考和解决问题， 提高将来在医学工作中处理相关突发性事故的能力[2-4]。

　　二 防原医学实验教学改革的措施

　　1 构建新的防原医学实验教学体系

　　实验教学和理论教学相辅相成， 是现代教学体系中不可缺少的重要组成部分， 是培养学生实践能力和创新精神的重要手段[5]。因此，我们要吸收科技发展的新成果，对教学内容进行改革， 吐陈纳新， 优选实验项目， 更新实验教学内容。如删掉一些单纯的验证理论的实验， 保留能解决实际问题的实验， 并开展细胞分子水平实验， 以充分反映防原医学当今特色。从而建立以基础性、综合与设计性、研究创新性实验为内容的多层次、多模式、创新实验课程体系。

　　2 积极应用现代实验教学的技术和手段

　　（1）积极使用多媒体教学

　　但是传统的实验教学是以板书、挂图加讲解为主， 课堂上根据板书讲解， 学员根据板书进行操作，这样大大地限制了课堂内容的扩展， 往往出现只满足于得出实验结果， 不注意思维能力培养的被动局面， 这种教学方法和手段显然与培养新型复合型人才的教育观念背道而驰。多媒体教学以其图文并茂、信息量大、趣味性强等特点在理论课教学中得到了普遍的应用。它可充分发挥其优势，实现知识面的延伸，并以简洁性、形象性、科学性的原则填补了传统教学方式的漏洞。在教学准备阶段， 教员能够灵活编写教案、制作幻灯， 可以根据教学内容搜索相关网络图像、视频材料， 针对有些操作比较困难或者带有危险性的现场实验可以用电脑演示来完成。在防原综合实验中采用多媒体教学手段不仅丰富了教学内容，激发了同学们的学习热情，而且还弥补了教学仪器相对较少的不足。另外，多媒体课件可以反复使用， 节省了教员大量重复备课、写板书的时间， 显著提高了工作效率。

　　（2）积极推行开放式实验教学

　　开放实验的实验内容原则上是指以培养学生的实践能力和创新精神为目的的实验。开放实验不仅是验证性、演示性实验， 还包括提高层次的综合性、设计性、研究性的实验。我们把学员分成若干实验小组，实验前在教员的帮助下查阅文献，并进行科研设计， 实验后进行医学论文撰写等。当学员通过实验得到了自己的实验成果时， 会产生一种强烈的满足感， 认识到基本操作在研究工作中的作用， 大大提高学习兴趣， 同时又体会到科学是严谨的、认真的、细致的。

　　（3）改进考试方式

　　课程考试或考核的目的是检验教与学的效果， 引导学生改进学习方法， 激发学生实验兴趣， 培养学生创新思维和创新能力， 促进教学内容的完善、教学方法的改进。平时实验成绩包括学生的实验预习、实验过程、实验效果和实验报告。实验考试可从全部实验中随机抽取1-2个实验进行单独现场考试或者可以是同学们讲解自己感兴趣或熟悉的仪器，可以是教员讲过的理论知识，也可以请同学讲解如何组织实施一场野外演练。总之， 对实验成绩的考评注重过程评价， 倡导并鼓励创新。

　　3加强实验教学师资队伍建设

　　随着医学科学技术的飞速发展和教学改革的不断深入， 人们越来越认识到实验教学在传授知识尤其在培养科学实验思维方法和基本技能方面有着重要作用。但实验教学内容和方法开设得越多， 对实验教学人员的要求也就越严。

　　因此，我们要鼓励高水平教师和中青年教师积极参加实验室建设与管理工作、补充优秀的研究生、博士生充实实验室技术人员队伍、鼓励实验室工作人员在职攻读学位、加强现有人员岗位技能培训、选派实验技术队伍骨干到国内外一流大学进修等。

　　而教员自身要加强理论学习，应用最新研究成果及时丰富理论教学，在进行理论讲解的时候需要对理论知识做一些扩展和更新。在注重基本知识、基础理论和基本技能训练的同时，加强新理论、新技术、新装备的教学，增加教学内容的高科技含量。

　　在教学实践过程中不断完善教学内容，有机地结合科研工作，充分发挥前沿研究成果、先进仪器设备和优秀人才队伍的优势，对学员进行人文科学、思想道德、理论学习和实践技能等多方面综合素质的培养，使教学内容更新颖，更加适应社会形势的发展和需要，迎合了学生强烈的求知欲望，有效地提高了教学效果。

　　参考文献

　　[1 ]　程天民。 军事预防医学概论[M ]. 北京： 人民军医出版社， 1999,4-11

　　[2]　冉新泽， 魏永江， 林远， 等。 实验教学准备及其相关问题浅谈[J ].第三军医大学学报， 2000, 22 （6） : 110-111

　　[3]　冉新泽， 林远， 粟永萍， 等。 将科研成果应用于实验教学的尝试[J ]. 中国高等医学教育， 1994, （3） : 31-32.

　　[4]　李珍芳。 改进实验教学提高实验素质[ J ]. 实验室研究与探索， 2003, 22 （6） : 15216.

　　[5]  杨玉炎， 王保人。 实验教学改革初探[J]. 无锡职业技术学院学报，2009,8（6）：79-81